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人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit實(shí)驗(yàn)原理
點(diǎn)擊次數(shù):1460 更新時(shí)間:2010-10-06

人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit實(shí)驗(yàn)原理


英文名稱:Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA
1. 采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit水平。
2. 首先用純化的人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit,再與HRP標(biāo)記的內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成    藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit呈正相關(guān)。
5.  zui后用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit濃度
。
目的:測(cè)定人的血清,血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit的含量。

6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
7. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清,如有沉淀,再次離心。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4   Elisa試劑盒請(qǐng)遠(yuǎn)離兒童
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
 
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
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